Цоліклони - це сольовий розчин моноклональних антитіл до антигенів еритроцитів людини.
Моноклональні антитіла використовують для визначення групи крові. Для їх отримання застосовують гібридомних технологію.
Цоліклони анти-А і анти-В призначені для визначення груп крові людини системи АВО натомість стандартних ізогем-агглютинирующих сироваток.
Цоліклони анти-А і анти-В є продуктом гібридомних клітинних ліній, отриманих в результаті злиття мишачих антітелообразующіх В-лімфоцитів з клітинами мишачої мієломи (пухлина кісткового мозку). Індивідуальні гібридомної лінії продукують гомогенні антитіла тільки одного класу імуноглобулінів, які повністю ідентичні за структурою і біологічної активності. Антитіла, які продукують клітинами одного клону (потомство однієї клітини), є моноклональними.
Довідка про клональних антитілах:
Культура клітин однієї специфічності, що походять з одного лімфоцита, утворює клітини одного клону. Головне полягає в наступному: необхідно отримати від однієї клітини специфічні антитіла і напрацювати їх у необмеженій кількості. Складність полягає в подоланні двох завдань: по-перше, нормальні клітини після декількох ділень погібают- по-друге, тільки ракові клітини здатні необмежено розмножуватися. Для вирішення цих двох несумісних проблем в 1975 році Г. Келер і К. Мільштейн створили клітинні гібриди, або гібридоми. Гібридоми - це злиття нормальних лімфоцитів в живильному середовищі з клітинами мієломи. Лімфоцити в цьому середовищі не гинуть, а від мієломні партнера отримують можливість нескінченно розмножуватися. Таким чином, гібридомних клан розмножується, а в результаті цього процесу утворюються моноклональні антитіла.
Лімфоцити, що несуть агтлютіноген А, виробляють специфічне антитіло анти-А- лімфоцити, що несуть агтлютіноген В, виробляють специфічне антитіло анти-В.
Моноклональні анти-А і анти-В антитіла продукуються двома різними Гібридоми. Цоліклони анти-А і анти-В являють собою розведену асцитної рідина мишей-носіїв відповідної гібридоми, в якій містяться специфічні імуноглобуліни класу М (IgM), спрямовані проти группоспецифических антигенів А або В людини.
Таким чином, Цоліклони не містять антитіл іншої специфічності і тому не викликають неспецифічної поліагглютінаціі еритроцитів.
Авідність, тобто час наступу реакції аглютинації і її вираженість, у Цоліклони анти-А і анти-В вище, ніж у ізогемагглютінірующіх АВО-сироваток, особливо у випадку слабко виражених антигенів еритроцитів.
Цоліклони використовують у вигляді порошку червоного (анти-А) або синього (анти-В) кольору, порошок розводять фізіологічним розчином натрію хлориду безпосередньо перед дослідженням.
Методика визначення групи крові за допомогою Цоліклони анти-А і анти-В:
Цоліклони анти-А і анти-В наносять на білий планшет по одній великій краплі (0,1 мл) під відповідними написами: анти-А і анти-В. Поруч з ними наносять по одній маленькій краплі (0,01 мл) досліджуваної крові. перемішування складових частин виробляють скляною паличкою або кутом предметного скла, які промивають і насухо витирають перед розмішуванням кожної краплі. Спостереження за реакцією проводять при легкому погойдуванні протягом не більше 2,5 хвилини. Позитивний результат при визначенні групи крові виявляє себе агглютинацией (склеюванням) еритроцитів. При цьому агглютінати можна побачити без будь-яких пристосувань у вигляді дрібних червоних агрегатів, швидко зливаються і утворюють великі пластівці.
При негативній реакції визначення групи крові крапля залишається рівномірно забарвленою в червоний колір, агтлютінати в ній не виявляються. Аглютинація, зазвичай, визначається протягом перших 3-5 секунд. Незважаючи на це, спостереження за результатами необхідно вести не менше 2,5 хвилини через можливість більш пізнього настання аглютинації з еритроцитами, що містять слабкі різновиди антигенів А або В.
Джерела:
- - веб-сайт, присвячений медицині
- Загальна хірургія: навчальний посібник / С. В. Петров. 3-е изд., Перераб. і доп. - М .: ГЕОСТАР-Медіа, 2006